正相色谱“快进”之谜：5分钟消失的保留时间去哪了？
引言：
“仪器没坏，方法没改，柱子也没问题，可样品的保留时间偏偏少了5分钟！”这可不是色谱版的“消失的它”，而是小鲁班最近遇到的真实悬案。最终，真相竟藏在一瓶“开封已久”的溶剂里……
正相体系“快进”，反相却正常
客户报修，同一台安捷伦1200液相色谱仪上，方法未发生变更，正相体系的保留时间比预期短了5分钟，分离度也变差，但反相体系却一切正常。这显然不是仪器“罢工”，而是某种选择性“偷懒”！
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| 正确的保留时间 | 少5min的保留时间 |
可疑因素
根据色谱理论，方法未发生变更的情况下，保留时间“缩水”可能和以下因素有关：
· 流动相流速异常（泵是否“虚标”了？）
· 色谱柱老化（柱子“退休”了？）
· 柱温失控（柱温箱在“摸鱼”？）
· 流动相组成变化（有人“调包”了溶剂？）
意想不到的真相
泵和柱子
· 泵头密封性和流速测试：泵头密封性测试良好，实际测量流速与设定流速一致——排除！
· 色谱柱平衡：更换新的色谱柱对比，保留时间依旧“快闪”——柱子无辜！
柱温
· 柱温箱显示温度正常，升高/降低温度测试，保留时间仍“我行我素”——温度背锅失败！
流动相“内鬼”浮出水面
· 检查方法：双通道等度方法无变更，更换比例阀测试、预混流动相单通道进样以及跳过脱气机进样也无改善……
· 关键突破：客户偶然提到：“这几批流动相是从用开封过的溶剂瓶内取出配的……”
· 实验验证：换用全新开封试剂配置流动相——保留时间瞬间恢复正常！
真相大白
开封已久的溶剂可能因挥发、吸水或污染导致组成发生变化，尤其是正相体系对溶剂纯度极其敏感，而反相系统因水-有机相缓冲能力强“躲过一劫”。
经验总结
色谱实验的“魔鬼”总在细节里！溶剂开封后需严格密封、定期更换，否则看似微小的污染也可能让你“时间消失”。下次遇到保留时间“前移”，不妨先检查那瓶被遗忘在角落的溶剂！
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